同时，研究配套开展大规模培养组学分析，通过23种培养基组合及98种预处理条件，从样本中成功分离得到8030株细菌，经MALDI-TOF质谱鉴定，这些菌株分属256种已知肠道细菌，为后续活菌功能验证、机制解析及菌株资源开发提供了宝贵材料。

对比海南普通成年人群，百岁老人肠道菌群呈现出显著的特异性特征，核心表现为产丁酸菌丰度大幅降低，而特定菌群则明显富集。其中，Faecalibacterium prausnitzii、Eubacterium hallii、Eubacterium ventriosum 等关键产丁酸菌，在百岁老人肠道中丰度显著下降；与之相反，大肠杆菌、脱硫弧菌以及古菌史密斯甲烷短杆菌的丰度则显著升高。进一步按年龄梯度分层分析发现，菌群结构随年龄增长呈现稳定的规律性变化，85-100岁人群体内厚壁菌门、拟杆菌门等菌群丰度最高，而百岁老人体内变形菌门与广古菌门丰度显著高于其他年龄组。回归分析也证实，产丁酸菌丰度与年龄呈负相关，大肠杆菌、产气荚膜梭菌、脱硫弧菌及史密斯甲烷短杆菌等菌群丰度则与年龄呈正相关，明确了这些菌群与极端长寿的潜在关联。

研究进一步验证了宏基因组测序与培养组学两种技术的高度互补性。两种方法联合共检出1430种肠道微生物，其中仅116种物种能被两种技术共同检出，占培养组学检出物种的42.17%；有140种物种仅能通过培养组学分离得到，422种物种仅能通过宏基因组测序检测到。这一结果充分说明，单一技术存在明显的检测盲区，超深度宏基因组与大规模培养组学联合，才能实现肠道菌群的全面、精准解析，避免低丰度关键菌或未知物种的遗漏，大幅提升研究结论的完整性与说服力，这也是当前高分微生物组研究的重要设计思路。

综上，本研究首次在中国南方百岁老人队列中，通过超深度宏基因组联合大规模培养组学，明确了长寿人群肠道菌群 “产丁酸菌减少、特定条件致病菌与古菌富集” 的核心特征，证实了两种技术联合在肠道菌群研究中的必要性与重要性。研究不仅为衰老、长寿及肠道稳态相关研究提供了关键微生物标志物，也建立了高分微生物组研究的技术范式，凸显了超深度宏基因组在挖掘低丰度及未知菌群、支撑高水平研究成果产出中的核心价值。