宿主细胞残留DNA提取试剂盒（磁珠法）

基因组DNA提取/宿主细胞残留DNA提取试剂盒（磁珠法）

宿主细胞残留DNA提取试剂盒（磁珠法）

使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，从各种生物制品的中间品、半成品和成品中提取并纯化残留的大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物等宿主细胞微量DNA的试剂盒。

产品货号	产品规格	目录价	促销价
HX3007S	50次	587.00	528.00
HX3007M	200次	1887.00	1698.00

▍产品信息

宿主细胞残留DNA提取试剂盒或残留DNA样品前处理试剂盒，是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，用于稳定、高效、便捷地从各种生物制品的中间品、半成品和成品中提取并纯化残留的大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物等宿主细胞微量DNA的试剂盒。制备的DNA样品可以用于相关DNA残留qPCR检测试剂盒。样品中蛋白首先被蛋白酶K消化，释放出来的基因组DNA在特定条件下与磁珠特异性结合。在外界磁场（如磁分离架）的作用下，磁珠与相应溶液可以快速高效地分离。随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，全程仅需约20 min即可完成。本试剂盒小包装可以抽提50个样品的总DNA，中包装可以抽提200个样品的总DNA。

▍产品应用

用于稳定、高效、便捷地从各种生物制品的中间品、半成品和成品中提取并纯化残留的大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物等宿主细胞微量DNA的试剂盒。制备的DNA样品可以用于相关DNA残留qPCR检测试剂盒。

▍产品保存

蛋白酶K和Glycogen -20ºC保存，其余均室温保存，一年有效。其中磁珠悬浮液长期不使用时，4ºC保存，可以保存更长时间。蛋白酶K和Glycogen室温（15-25ºC）存放，至少一周有效。

▍产品组分

组分编号	组分名称	组分规格
HX3007-1	磁珠悬浮液	1 ml	4 ml
HX3007-2	蛋白酶K	1 ml	4 ml
HX3007-3	洗涤液Ⅰ（首次使用前加入7 ml/ 28 ml无水乙醇）	21 ml	84 ml
HX3007-4	洗涤液Ⅱ（首次使用前加入24 ml/ 96 ml无水乙醇）	16 ml	64 ml
HX3007-5	洗脱液	10 ml	40 ml
HX3007-6	Glycogen（20 mg/ml, DNase free）	50 μl	200 μl

▍注意事项

1. 需备磁分离装置，某些步骤需使用55ºC水浴，请提前作好准备。除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10 sec左右。所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。建议使用带滤芯的吸头配制PCR体系，这样可以最大限度的避免污染导致的假阳性。

2. 磁珠在静置后会发生沉降，使用前一定要适当涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象，可以在磁珠聚集后晃动管内液体，使挂壁的磁珠流下。请使用推荐的样品量。如果样品量过大，可能造成磁珠聚集，会影响洗涤进而影响抽提获得的DNA纯度。发生磁珠聚集时，洗涤时需尽量分散磁珠，这样可有效改善抽提效果。如果发生磁珠聚集现象，建议在后续实验中适当减少样品用量。

3. 首次使用前洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ需按照说明书和标签上的指示添加无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 需要用户自备的耗材、仪器和试剂：

磁分离装置、水浴锅、涡旋振荡器、DNase-free、RNase-free的吸头、离心管，无水乙醇、PBS。

2. 样品准备：

a. 如果样品为中间品或半成品，宿主细胞DNA残留较多，为了保证检测的准确性，使检测值在标准曲线线性范围之内，需要用PBS进行适当比例稀释后再纯化提取。

b. 如果样品为干粉形式，可用超纯水将样本稀释成1-100 mg/ml后使用。

3. 样品DNA提取：

a. 收集100 μl样品于1.5 ml离心管中，加入100 µl PBS并混匀。

建议每个样品进行平行的三次DNA提取处理。如果预计残留量非常少并且没有低吸附的吸头、离心管，建议在每个样品中添加1 µl Glycogen (20 mg/ml, DNase free) 以提高提取效率、减少核酸吸附损耗；也可进一步添加Yeast RNA (DNase, RNase &Proteinase Free)或Carrier RNA (Poly A)，具体用量参见相关产品说明书。

b. 加入20 µl蛋白酶K，混匀。55ºC孵育30 min。若样品中蛋白浓度＞50 mg/ml，建议增加蛋白酶K的用量至40 µl，或者延长孵育时间至60 min。

c. 加入200 µl无水乙醇，Vortex混匀。

加入乙醇后必须充分混匀，否则会严重影响抽提效果。加入乙醇后可能会产生白色沉淀，属正常现象，后续步骤中必须把白色沉淀和溶液全部用于和磁珠的结合，沉淀不会影响抽提效果。

d. 向步骤c中的混合物加入20 µl磁珠悬浮液（使用前务必混匀），轻柔混匀后，室温放置5-10 min（每隔3 min涡旋混匀10 sec）。将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸除残液。如有必要，可适当增加磁珠用量，延长结合时间以提高得率。

e. 加入500 µl洗涤液Ⅰ，轻柔震荡使磁珠分散开，颠倒两次后将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，尽量吸净残液。

f. 加入600 µl洗涤液Ⅱ，轻柔震荡使磁珠分散开，颠倒两次后将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，尽量吸净残液。

g. 将离心管室温放置5-10 min，或置于37ºC鼓风烘箱5 min，确保残留的乙醇等微量液体完全挥发。

h. 加入50-100 μl洗脱液，轻柔震荡使磁珠悬于溶液中，室温孵育3-5 min，其间甩动离心管1-2次。将离心管置于磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸取溶液至新离心管中，置于-20ºC保存。所得溶液即为纯化的总DNA。

下载产品使用说明书

Q：为什么基因组DNA纯度不高？

A：磁珠残留乙醇，确保离心管开盖晾至干燥，使残留在磁珠上的乙醇完全挥发；洗涤不充分。

Q：为什么电泳的DNA条带拖带弥散或加样孔位置较亮？

A：DNA上样量过多，可以按照胶孔体积适当加入；有蛋白等杂质污染；DNA完全或部分降解；电泳条件不对或需要更换使用新的电泳缓冲液；一些较大的基因组会堵在孔中，较难发生电泳迁移，造成孔内较亮。琼脂糖凝胶浓度较高会造成孔内较亮，合适的凝胶浓度通常宜为0.8-1%。

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