▍产品信息

本试剂盒采用磁珠结合吸附的方式，能够快速分离纯化提取植物基因组DNA，无需使用有毒的苯酚-氯仿提取或耗时的酒精沉淀，洗涤过程无需高速离心，更安全、便捷、快速且节约时间，适用于不同植物物种和组织类型如根、茎、叶、芽等样品。植物样品在液氮研磨后与裂解液孵育，或在裂解液中进行研磨，然后离心取上清溶液，加入适量无水乙醇混匀后与磁珠孵育，释放出来的基因组DNA在特定条件下与磁珠特异性结合。在外界磁场（如磁分离架）的作用下，磁珠与相应溶液可以快速高效地分离。随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15 min即可完成。纯化得到的植物基因组DNA的长度最长可达50 kb左右，平均为30 kb左右，最短为100 bp的DNA也可以被纯化。可以从10-100 mg植物样品中抽提获得约1-15 μg的基因组DNA，OD260/OD280的范围通常在1.6至1.9之间。可以根据植物材料不同调整起始重量，使用的样品过多反而会影响抽提效果。按照本试剂盒的标准操作步骤抽提得到的植物基因组DNA会含有少量的RNA，但如果按照可选步骤加入适量的DNase free的RNase A，就可以获得不含RNA的高纯度总DNA。含有RNA的总DNA可以用于PCR，但对于某些其它的后续反应可能会产生一些影响。本试剂盒中的磁珠，每20 µl磁珠悬浮液对于DNA的最大结合容量约为30 μg。本试剂盒小包装和中包装分别可以抽提50个和200个植物样品的基因组DNA。

▍产品应用

快速分离纯化提取植物基因组DNA。

▍产品保存

蛋白酶K -20ºC保存，其余均室温保存，一年有效。其中磁珠悬浮液长期不使用时，4ºC保存，可以保存更长时间。蛋白酶K室温（15-25ºC）存放一周，活力无明显下降。

▍产品组分

▍注意事项

1. 尽可能使用新鲜的植物样品，以确保提取获得完整的、质量较高的基因组DNA。小心使用液氮，防止被液氮冻伤。样品从液氮中取出时，应立即打开管盖防止温差造成的离心管炸裂，同时液氮研磨样品时需不断添加液氮。

2. 需自备磁分离装置，配合使用水浴锅/金属浴仪、电动研磨仪/研钵、研磨棒、涡旋振荡器、高速离心机，某些步骤需使用55ºC和65ºC水浴，请提前作好准备。除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10 sec左右。所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。

3. 蛋白酶K对人体有呼吸道、生殖等特定器官毒性，或致畸致癌毒性，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

4. 如需制备不含RNA的高纯度基因组DNA，需自备DNase free的RNase A。

5. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生，属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀，55ºC水浴孵育使沉淀溶解，混匀后使用。

6. 磁珠在静置后会发生沉降，使用前一定要适当涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象，可以在磁珠聚集后晃动管内液体，使挂壁的磁珠流下。请使用推荐的样品量。如果样品量过大，可能造成磁珠聚集，会影响洗涤进而影响抽提获得的DNA纯度。发生磁珠聚集时，洗涤时需尽量分散磁珠，这样可有效改善抽提效果。如果发生磁珠聚集现象，建议在后续实验中适当减少样品用量。请勿长时间干燥磁珠，干燥过度将导致磁珠不可逆的聚集，从而降低洗脱效率。

7. 首次使用前洗涤液I需添加11 ml/44 ml无水乙醇，洗涤液II需添加33 ml/132 ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。洗涤液I和洗涤液II对人体有害或有刺激性，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

8. 洗脱磁珠上的DNA时，可以将洗脱液加热至65ºC，能够提高植物基因组DNA的洗脱效率。