建库试剂盒 mRNA-seq试剂盒

核序生物Ribo-seq试剂盒用于高通量测序文库的制备，专门针对核糖体保护的mRNA片段的测序文库制备。该试剂盒通过高效、简便的实验流程，帮助研究人员快速获得高质量的Ribo-Seq数据。核序生物Ribo-seq试剂盒兼容MGI和Illumina高通量测序平台，同时也兼容不同测序平台的 Full Adapter 和 Truncated Adapter。RNA起始量在100 ng-1 μg。

Ribo-seq技术在癌症、代谢疾病等研究中广泛应用，通过测序核糖体保护的mRNA片段，揭示基因表达调控的细节。试剂盒中每种试剂都经过了严格的质量控制，适用于低样本量实验，提高建库效率。且每一批次的建库试剂盒都经过了建库和上机测序的验证，保证每一批次的试剂盒性能质量稳定。

核序生物Ribo-seq试剂盒需要搭配rRNA剔除模块，及接头试剂盒相关产品。

高灵敏度：适用于低输入量的RNA样本，确保低丰度转录本的检测。
快速便捷：优化的实验流程，缩短建库时间，提高实验效率。
高重复性：保证样本间的高度一致性，便于数据比对和分析。
兼容性强：适用于多种样本类型，包括动物细胞、组织、植物、真菌和临床样本。
产品保存：-20℃
产品组分：

组分编号	组分名称	8次	24次	96次	100次
12309	Nuclease	X	X	X	X
12398	mRNA Capture Beads	X	X	X	X
12387	Beads Binding Buffer	X	X	X	X
12376	Beads Wash Buffer	X	X	X	X
12365	Ligation Enhancer	X	X	X	X
12354	Novel T4 DNA Ligase	X	X	X	X

使用说明：

1、本试剂盒提供完整的核糖体图谱分析（Ribo-seq）解决方案，包含核糖体保护片段（RPFs）提取、RNA片段化、文库构建及纯化所需试剂，适用于翻译组学研究。

2、使用新鲜或液氮速冻的细胞（≥1×10^6个），裂解后离心获取上清液。推荐添加环己酰亚胺（终浓度100 μg/mL）以稳定核糖体。

3、加入10 μL RNase I（试剂盒提供），25°C消化45分钟。使用离心柱（试剂盒内附）纯化RPFs，洗脱体积30 μL。

常见问题：

Q1：RPFs产量低可能的原因？

细胞裂解不彻底：优化裂解缓冲液比例或延长裂解时间。

RNase I活性不足：检查酶保存条件（避免反复冻融）或延长消化时间。

Q2：测序数据中rRNA污染高如何解决？

建议在文库构建前使用rRNA去除试剂盒（如Ribo-Zero）。

检查RNase I消化效率，确保核糖体未被过度降解。

Q3：文库片段大小异常（非28 nt）？

可能因RNA片段化时间过长：缩短70°C反应至5-8分钟。

检查T4 PNK酶活性，确保末端修复完整。

Q4：试剂盒可兼容哪些测序平台？

默认适配Illumina平台（兼容PE50/PE100），如需其他平台接头需定制。

参考文献：

Ingolia, N.T. et al. (2009). Genome-wide analysis in vivo of translation with nucleotide resolution using ribosome profiling. Science, 324(5924), 218-223.

试剂盒优化方案：*[附件]RB-1000_Optimization_Guide.pdf*

下载产品使用说明书

产品编号	产品名称	包装
12309	Nuclease	XXXXXX
12398	mRNA Capture Beads	XXXXXX
12387	Beads Binding Buffer	XXXXXX
12376	Beads Wash Buffer	XXXXXX
12365	Ligation Enhancer	XXXXXX
12354	Novel T4 DNA Ligase	XXXXXX

使用本产品的文献或相关技术文章：

标题：High-resolution ribosome profiling reveals dynamic translational regulation in response to oxidative stress

作者：Zhang L, et al. (2025)

期刊：Nucleic Acids Research (IF: 16.8)

摘要：
使用RB-1000 Ribo-seq试剂盒对HEK293T细胞进行核糖体图谱分析，揭示了氧化应激下哺乳动物细胞中UORF（上游开放阅读框）介导的翻译重编程机制。数据表明，试剂盒的低噪音特性可有效捕获短肽（<10 aa）的翻译事件。

使用本产品的文献或相关技术文章：

标题：High-resolution ribosome profiling reveals dynamic translational regulation in response to oxidative stress

作者：Zhang L, et al. (2025)

期刊：Nucleic Acids Research (IF: 16.8)

摘要：
使用RB-1000 Ribo-seq试剂盒对HEK293T细胞进行核糖体图谱分析，揭示了氧化应激下哺乳动物细胞中UORF（上游开放阅读框）介导的翻译重编程机制。数据表明，试剂盒的低噪音特性可有效捕获短肽（<10 aa）的翻译事件。

1. 实验设计与样本准备

Q1.1：该试剂盒适用于哪些物种？

支持广泛物种：包括哺乳动物（人、小鼠、大鼠）、植物（拟南芥、水稻）、酵母、细菌等。针对不同物种，可调整 RNase I消化时间（如细菌建议15-20分钟，哺乳动物建议45分钟）。

Q1.2：最低需要多少细胞量？

推荐起始量：

常规实验：≥1×10^6 个细胞（可获得高信噪比数据）。

低起始量优化：使用低输入版本（RB-1000-LI）可低至 5×10^4 个细胞（需搭配rRNA去除步骤）。

Q1.3：是否需要添加翻译抑制剂（如环己酰亚胺）？

建议添加：

在细胞裂解前加入环己酰亚胺（CHX, 100 μg/mL）以稳定核糖体。

若研究翻译动态（如应激响应），可尝试 Harringtonine（哈林顿碱）进行起始位点捕获。

2. 实验设计与样本准备