▍产品信息
pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template是一种用于体外基于T3、SP6或T7 Promoter进行RNA转录的线性化质粒模板。该质粒中的PstI/SacI位点反向插入了人β-actin基因的125 bp cDNA片段(X00351的823-947核苷酸片段),已经用HindIII 限制性内切酶进行了线性化处理,可以直接使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶的任何一种进行体外转录。从本线性化模板可以转录产生与人β-actin mRNA互补的RNA探针,也可以用于测定T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶的活性。当使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶进行体外转录时,获得的RNA的长度分别为221 nt、198 nt和175 nt。从该模板合成的转录产物可用作核糖核酸酶和S1核酸酶保护试验的探针;在Northern和Dot blots中可作为内参或用于建立每个样品中RNA相对量的参考;与人总RNA杂交可保护人β-actin mRNA的125个核苷酸片段不被RNase A和RNase T1消化。pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
Ampicillin promoter | 96-200 |
Ampicillin resistance ORF | 201-1061 |
ori | 1232-1820 |
lac promoter | 2144-2174 |
lac operator | 2182-2198 |
M13 reverse primer binding site | 2206-2222 |
T3 promoter | 2238-2257 |
SP6 promoter | 2261-2280 |
T7 promoter | 2284-2303 |
β-actin-125-Human Antisense Template | 2327-2451 |
Multiple cloning site | 2307-2326/2452-2480 |
M13 forward primer binding site | 2484-2500 |
pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template质粒(2878 bp)的图谱如下:
pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template的多克隆位点的详细图谱如下:
pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template包括:
pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template)包括:
pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template的全序列信息请参考核序网站上该质粒的信息。
▍产品保存
-20℃保存
▍产品组分
组分编号 | 组分名称 | 组分规格 |
HX2001 | pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template | 10 μg |
▍注意事项
1. 如果用于制备RNA探针并用于RNase Protection Assay (RPA)实验,即Nuclease Protection Assay (NPA)实验,建议对制备的RNA探针进行PAGE纯化。
2. 本质粒未经核序书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。