琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（磁珠法）

DNA纯化胶回收/琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（磁珠法）

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（磁珠法）

使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，从DNA琼脂糖凝胶中回收目的DNA的试剂盒。

产品货号	产品规格	目录价	促销价
HX3046S	50 T	264.00	237.00
HX3046M	200 T	839.00	755.00

▍产品信息

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（磁珠法）（DNA Gel Extraction Kit with Magnetic Beads）是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，用于稳定、高效、便捷地从DNA琼脂糖凝胶中回收目的DNA的试剂盒。适合PCR产物、质粒DNA酶切出来的DNA片断、超螺旋质粒DNA单酶切后的线性化产物或DNA连接产物等在琼脂糖凝胶电泳后切胶产物的回收。纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。

琼脂糖凝胶在融胶液中迅速融解，DNA充分释放，再与磁珠特异性结合，在外界磁场（如磁分离架）的作用下，磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离，经洗涤充分除杂质，最后用洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来，即可获得高纯度的目的DNA样品。本产品具有融胶速度快、操作灵活便捷、回收效率高、纯度好、可回收DNA片段大小范围广等优点。根据实际状况灵活调节磁珠用量，通常20 min内即可完成目的DNA片段的回收。适用于100 bp以上DNA片段的纯化，对达到10 kb片段DNA的纯化也能保持较好的效果。通常回收率达到60-80%，对200 bp以下小片段和10 kb以上大片段的回收率有所下降。目前凝胶DNA回收的方法主要为柱回收法，该方法通常需要反复离心，或者需要特殊的抽滤装置，柱纯化过程中的纤维切割对大片段DNA回收不太有利。而磁珠法条件温和，整个操作步骤无需繁琐的反复离心或抽滤操作，以简单的磁铁吸附所代替，确保了操作的快速和便捷。和传统的纯化方法相比，操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂。本试剂盒的融胶液缓冲能力较强，经测试不会因融胶而出现体系pH变化幅度大而导致DNA与磁珠结合能力下降的情况，因此体系中无需添加甲酚红指示剂进行特定情况的纠正。

▍产品应用

使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，用于稳定、高效、便捷地从DNA琼脂糖凝胶中回收目的DNA。适合PCR产物、质粒DNA酶切出来的DNA片断、超螺旋质粒DNA单酶切后的线性化产物或DNA连接产物等在琼脂糖凝胶电泳后切胶产物的回收。纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。

▍产品保存

室温保存，一年有效。其中Buffer Beads长期不使用时，4ºC保存，可以保存更长时间。

▍产品组分

组分编号	组分名称	规格 50 T	规格 200 T
HX3046-1	Buffer Beads（磁珠悬浮液）	1.5 ml	6 ml
HX3046-2	Buffer P1（融胶液）	20 ml	80 ml
HX3046-3	Buffer WB（洗涤液，首次使用前加入39 ml/78 ml×2无水乙醇）	26 ml	52 ml×2
HX3046-4	Buffer EB（洗脱液）	5 ml	20 ml

▍注意事项

1. 需自备无水乙醇和磁分离装置。

2. Buffer Beads磁珠悬液在静置后会发生沉降，使用前一定要涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀后再使用。磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象，可以在磁珠聚集后晃动管内液体，使挂壁的磁珠流下。

3. 本产品适用于手工抽提，也可用于工作站或核酸自动提取仪。

4. 为提高回收效率，电泳时最好更换电泳液并适当降低电压以避免电泳过程中溶液发热，切胶时应尽量减少紫外照射时间以减少DNA损伤并尽可能割除不含DNA的凝胶部分。

5. Buffer P1对人体有一定的刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。

6. 首次使用前在每瓶Buffer WB中加入指定量的无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。

7. 可用去离子水代替洗脱液进行洗脱，但去离子水的pH不应低于6.5，如偏低可用低浓度NaOH溶液调节至7.5-8.5。

8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 切胶回收后，称重，将胶切碎或在离心管内用1 ml枪头捣碎。

2. 加入等体积的Buffer P1，如胶为100 mg，则加100 µl Buffer P1，vortex或颠倒混匀。

注：通常一次不超过800 mg，如样品量大于800 mg，则应先取部分与磁珠进行结合，磁分离弃上清后加入剩余样品继续与磁珠结合。

3. 50-60ºC水浴加热约10 min至胶全融，期间需轻微vortex或颠倒混匀3-4次，以加速凝胶融解。

注：如果胶碎片较小，3-5 min即可全融，凝胶碎片较大则需较长时间，胶全融后至少再加热2 min。50-60℃间任一温度都适合于本试剂盒。如果DNA片断大于5 kb，宜颠倒混匀，vortex容易导致大片断DNA断裂。

4. 参照下表用量加入Buffer Beads（使用前务必混匀），vortex或颠倒混匀后，室温放置3-5 min。将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸除残液。

注：磁珠在使用前一定要涡旋或震荡混匀。如有必要，可适当增加磁珠用量，延长结合时间以提高得率。

胶块重量 (mg)	Buffer Beads (µl)	① Buffer WB (µl)	② Buffer WB (µl)	Buffer EB (µl)
10-100	10	250	500	20-30
100-250	20	500	500	40-50
250-500	30	750	500	60-80
500-800	40	1000	500	80-100

5. 参照上表，通常加入250-750 µl Buffer WB，点震涡旋或轻柔震荡使磁珠分散开，颠倒两次后将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸除残液。

注：如果离心管内盖有磁珠，可按住离心管整体上下颠倒两次，使磁珠被完全吸附，然后弃去上清。Buffer WB用量可随磁珠的用量适当增减。通常Buffer WB用量为磁珠悬浮液用量的25倍左右，即20 µl Buffer Beads加入500 µl Buffer WB，30 µl Buffer Beads加入750 µl Buffer WB。

6. 加入500 µl Buffer WB，重复5的操作，最终尽量吸净残液。

7. 将离心管置于37ºC鼓风烘箱5 min，或室温放置5-10 min，确保残留的乙醇等微量液体完全挥发。

8. 参照上表，加入20-100 μl Buffer EB，点震涡旋或轻柔震荡使磁珠悬于溶液中，室温孵育3-5 min，其间甩动离心管2-3次。将离心管置于磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸取溶液至新离心管中，置于-20ºC保存，所得溶液即为回收的DNA样品。

注：Buffer EB的用量可参考步骤4后表格，其用量一般随磁珠用量增加而相应增加，为提高洗脱效率，通常不少于磁珠用量的2倍，为提高样品浓度，也可适当减少Buffer EB用量。约50-55ºC洗脱比室温洗脱效率略高。

下载产品使用说明书

Q：为什么回收效率低？

A：凝胶未完全溶解（缓冲液不合适或加热时间不足）；磁珠与DNA结合不充分（缓冲液pH或醇类浓度不合适）；DNA片段过小（<100 bp）或过大（>10 kb），磁珠吸附效率下降；磁珠量不足或过量。

Q：为什么DNA洗脱效率低？

A：洗脱液pH不合适（推荐使用Tris-HCl或超纯水，pH 8.0-8.5）；洗脱时间不足或温度过低；磁珠未完全干燥（残留乙醇抑制洗脱）。

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