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DNA纯化胶回收/PCR/DNA纯化试剂盒(磁珠法)
PCR/DNA纯化试剂盒(磁珠法)
PCR/DNA纯化试剂盒(磁珠法)
PCR/DNA纯化试剂盒(磁珠法)
使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,从PCR产物或多种DNA反应体系中提取纯化DNA的试剂盒。


产品货号

产品规格

目录价

促销价

HX3044S

50 T

264.00

237.00

HX3044M

200 T

839.00

755.00


产品信息

PCR/DNA纯化试剂盒(磁珠法)是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,用于稳定、高效、便捷地从PCR产物或多种DNA反应体系中提取纯化DNA的试剂盒。适用于PCR反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质,也同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化。所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。

样品中的DNA与磁珠特异性结合,在外界磁场(如磁分离架)的作用下,磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离,经洗涤充分除杂质,最后用洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来,即可获得高度纯化的DNA样品。本试剂盒具有效果稳定、纯度好、操作灵活便捷、可纯化DNA片段大小范围广等优点。根据实际状况灵活调节磁珠用量,通常15 min内即可完成纯化。适用于100 bp以上DNA片段的纯化,对达到10 kb片段DNA的纯化也能保持较好的效果,对长至30个碱基的引物可被完全去除,通常回收率达到90%以上,同时也适用于低浓度样品的浓缩。目前DNA纯化的方法主要为柱纯化试剂盒法,该方法通常需要反复离心,或者需要特殊的抽滤装置,柱纯化过程中的纤维切割对大片段DNA回收不太有利。而磁珠法条件温和,整个操作步骤无需繁琐的反复离心或抽滤操作,以简单的磁铁吸附所代替,确保了操作的快速和便捷,和传统的纯化方法相比,操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂。


产品应用

使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,用于稳定、高效、便捷地从PCR产物或多种DNA反应体系中提取纯化DNA,所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。


产品保存

室温保存,一年有效。其中Buffer Beads长期不使用时,4ºC保存,可以保存更长时间。


产品组分

组分编号

组分名称

规格

50 T

规格

200 T

HX3044-1

Buffer Beads(磁珠悬浮液)

1.5 ml

6 ml

HX3044-2

Buffer P1(结合液)

20 ml

80 ml

HX3044-3

Buffer WB(洗涤液,首次使用前加入39 ml/78 ml×2无水乙醇)

26 ml

52 ml×2

HX3044-4

Buffer EB(洗脱液)

5 ml

20 ml


注意事项

1. 本产品适用于手工抽提,也可用于工作站或核酸自动提取仪。

2. 需自备无水乙醇和磁分离装置。

3. Buffer Beads磁珠悬液在静置后会发生沉降,使用前一定要涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象,可以在磁珠聚集后晃动管内液体,使挂壁的磁珠流下。

4. 温度较低时,Buffer P1可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀,可置37ºC水浴加热溶解,混匀后使用。Buffer P1对人体有一定的刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。

5. 次使用前在每瓶Buffer WB中加入指定量的无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。

6. 可用去离子水代替洗脱液进行洗脱,但去离子水的pH不应低于6.5,如偏低可用低浓度NaOH溶液调节至7.5-8.5。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 加入等体积的Buffer P1,颠倒混匀。例如DNA样品体积为100 µl,则加100 µl Buffer P1。

2. 根据样品体积,参照下表用量加入Buffer Beads(使用前务必混匀),颠倒混匀后,室温放置3-5 min。将离心管置于磁力架的磁场中,待磁珠完全聚集后,小心吸除残液。

注:磁珠在使用前一定要涡旋或震荡混匀。如有必要,可适当增加磁珠用量,延长结合时间以提高得率。

样品体积 (µl)

Buffer Beads (µl)

Buffer WB (µl) ①

Buffer WB (µl) ②

Buffer EB (µl)

10-100

10

250

500

20-30

100-250

20

500

500

40-50

250-500

30

750

500

60-80

500-800

40

1000

500

80-100

3. 参照上表,通常加入250-750 µl Buffer WB,轻柔震荡使磁珠分散开,颠倒两次后将离心管置于磁力架的磁场中,待磁珠完全聚集后,小心吸除残液。

注:如果离心管内盖有磁珠,可按住离心管整体上下颠倒两次,使磁珠被完全吸附,然后弃去上清。Buffer WB用量可随磁珠的用量适当增减。通常Buffer WB用量为Buffer Beads用量的25倍左右,即20 µl Buffer Beads加入500 µl Buffer WB,30 µl磁珠悬浮液加入750 µl Buffer WB。

4. 加入500 µl Buffer WB,重复3的操作,最终尽量吸净残留液体。

5. 将离心管置于37ºC鼓风烘箱5 min,或室温放置5-10 min,确保残留的乙醇等微量液体完全挥发。

6. 参照上表,加入20-100 μl Buffer EB,轻柔震荡使磁珠悬于溶液中,室温孵育3-5 min,其间甩动离心管2-3次。将离心管置于磁场中,待磁珠完全聚集后,小心吸取溶液至新离心管中,置于-20ºC保存,所得溶液即为纯化的DNA样品。

注:Buffer EB的用量可参考步骤2后表格,其用量一般随磁珠用量增加而相应增加,为提高洗脱效率,通常不少于Buffer Beads用量的2倍。为提高样品浓度,也可适当减少Buffer EB用量。约50-55ºC洗脱比室温洗脱效率略高。

Q:为什么得率低(DNA回收量少)?

A:磁珠与DNA结合不充分(缓冲液条件不合适,如PEG或盐浓度不足);样本起始量过低或DNA片段过小(<100 bp);洗涤过程中DNA流失(过度洗涤或乙醇残留)。

Q:为什么会有污染物残留(如引物、盐、蛋白质)?

A:洗涤不彻底、乙醇未完全干燥或磁珠未充分重悬。

Q:为什么DNA洗脱效率低?

A:洗脱液体积过小、洗脱时间不足或磁珠过度干燥。

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