病毒RNA/DNA提取试剂盒（磁珠法）

DNA/RNA/蛋白共提取/病毒RNA/DNA提取试剂盒（磁珠法）

病毒RNA/DNA提取试剂盒（磁珠法）

从含病毒的血浆、血清、体液、拭子及细胞及其培养上清、组织等样品中抽提RNA/DNA的试剂盒。

产品货号	产品规格	目录价	促销价
HX3034S	10 T	132.00	119.00
HX3034M	50 T	563.00	506.00
HX3034L	200 T	1888.00	1699.00

▍产品信息

病毒RNA/DNA提取试剂盒（磁珠法）是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，从含病毒的血浆、血清、体液、拭子及细胞及其培养上清、组织等样品中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提RNA/DNA的试剂盒。样品在裂解液中迅速裂解，释放出总RNA/DNA，然后让RNA/DNA特异性地结合到磁珠上，再通过3次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质，最后用洗脱液将高纯度的RNA/DNA洗脱下来。使用安全，通过特殊的磁珠进行病毒RNA/DNA分离纯化，能有效避免传统的Trizol法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂；使用快速、便捷，采用磁珠纯化，无需繁琐的病毒RNA/DNA沉淀步骤，抽提操作过程仅15-20 min。相比于传统的Trizol抽提法或DNA抽提方法，操作流程显著简化，缩短了抽提时间，降低了病毒RNA/DNA被降解的风险。适用于含病毒的血浆、血清、体液、拭子及细胞及其培养上清、组织等样品中病毒RNA/DNA的抽提。对于样品中RNA/DNA含量较低的情况下，为提高病毒RNA/DNA的提取量，建议自备Carrier RNA。Carrier RNA一方面可以提高微量病毒RNA/DNA在纯化过程中与磁珠的结合效率和洗脱效率，另一方面可以降低被可能存在的痕量残留RNase降解的风险。Carrier RNA在病毒含量越低的情况下效果越为明显。

抽提获得的病毒RNA/DNA样品（可能同时含有样品中的其它RNA/DNA），后续可以用于病毒感染检测、病毒滴度检测各种常规用途。抽提得到的病毒RNA/DNA可用于qRT-PCR、反转录、RT-PCR、PCR、qPCR、Northern、Southern、点杂交、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA或DNA克隆等下游实验；也可用于基因表达芯片分析、高通量测序等对RNA/DNA质量要求较高的情况。

▍产品应用

使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，从含病毒的血浆、血清、体液、拭子及细胞及其培养上清、组织等样品中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提RNA/DNA。

▍产品保存

室温保存，一年有效。Buffer Beads长期不使用时，4ºC保存，可以保存更长时间。

▍产品组分

组分编号	组分名称	规格 10 T	规格 50 T	规格 200 T
HX3034-1	Buffer Beads（磁珠悬浮液）	0.2 ml	1 ml	4 ml
HX3034-2	Buffer P1（裂解液）	6 ml	30 ml	120 ml
HX3034-3	Buffer P2（结合液，首次使用前加 3.5 ml/17.5 ml/70 ml无水乙醇)	2.5 ml	12.5 ml	50 ml
HX3034-4	Buffer WB1（洗涤液I）	6.5 ml	32 ml	125 ml
HX3034-5	Buffer WB2（洗涤液II，首次使用前需加 9 ml/45 ml/90 ml×2无水乙醇）	3.6 ml	18 ml	36 ml×2
HX3034-6	Buffer EB（洗脱液）	1 ml	5 ml	20 ml

▍注意事项

1. 需自备磁分离装置，自备Carrier RNA。

2. 如果样品中含有细胞或组织，不影响病毒RNA/DNA的抽提，但须注意抽提获得的病毒RNA/DNA中包含细胞或组织的RNA/DNA。为提高病毒RNA/DNA的提取量，本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是DNase/RNase-free，操作时应小心，避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是DNase/RNase-free。如果可能有DNase/RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话，以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。

3. 使用冻存的样品抽提RNA的效果通常比新鲜的样品差一些。因为在样品冻融过程中一些RNase会被释放出来并消化样品中的RNA，建议尽量避免冻融。对于病毒样品，推荐使用病毒RNA稳定保存液进行保存以保证样品RNA的完整性。

4. 首次使用前Buffer P2需添加3.5 ml/17.5 ml/70 ml无水乙醇，Buffer WB2需添加9 ml/45 ml/90 ml×2无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。

5. 本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。Buffer P2、Buffer WB2中首次使用前添加无水乙醇后，须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。

6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 样品的准备：

a. 液体样品的准备：含病毒的血浆、血清、无细胞体液、拭子、细胞培养上清等样品，按照常规方法取样。每100 µl液体样品加入300 µl Buffer P1。轻轻颠倒混匀3-5次。

选做：为提高病毒RNA/DNA的提取量，建议在不含或含很少细胞或者组织的样品中加入Carrier RNA，每个病毒样品需要2-5 µg Carrier RNA，直接添加至Buffer P1中即可。

b. 细胞样品的准备：收集50-100万左右带有病毒的细胞。对于悬浮细胞，1000-2000×g离心1 min后弃上清，加入300 μl Buffer P1，轻轻吹打8-10次至固悬物溶解、溶液澄清；对于贴壁细胞，吸净培养液后加入300 μl Buffer P1，轻轻吹打5-10次至固悬物溶解、溶液澄清，转移至一洁净离心管内。

c. 组织样品的准备：取15-20 mg带有病毒的动物组织，置于液氮中研磨成粉末，立即加入600 μl Buffer P1。也可将组织置于1.5 ml离心管中，迅速加入600 μl冰浴预冷的Buffer P1，用微型电动匀浆器匀浆，或者用普通玻璃匀浆器进行匀浆。研磨或匀浆后，轻轻吹打匀浆液8-10次，室温放置3-5 min。然后约14,000×g离心2 min，将上清液移至新的离心管中。对于比较容易裂解且匀浆很充分的组织（如肝组织、脑组织等）可以不用高速离心而直接进入步骤2。

注：细胞的数量一般不超过500万，不超过100万细胞宜使用300 μl Buffer P1，多于100万细胞宜使用600 μl Buffer P1。动物组织的用量一般不超过30 mg，用量过多可能会因裂解不充分导致得率下降。组织样品在裂解和离心后，离心管下部可能会有一些胶状物质，宜作为上清转移至下一步操作。如果弃除胶状物，会导致得率下降约30-50%。后续加入Buffer P2后胶状物会消失。离心是为了去除未匀浆充分的明显块状物。如果裂解后仍有粘稠物，需增加吹打次数至溶液完全澄清。对于富含RNase的样品，Buffer P1中宜添加DTT至终浓度为40 mM或添加β-巯基乙醇至终浓度为1%。

2. 加入等体积（病毒样品和裂解液的总体积）Buffer P2至裂解产物中，轻轻颠倒混匀3-5次。此时可能会有沉淀物产生，属于正常现象。

3. 加入20 µl Buffer Beads（使用前务必混匀），轻柔混匀后，室温放置3-5 min。将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸除液体。

注：磁珠在使用前一定要涡旋或震荡混匀。如有必要，可适当增加磁珠用量，延长结合时间以提高得率。

4. 加入600 µl Buffer WB1，轻柔震荡使磁珠分散开，颠倒两次后将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，尽量吸净液体。

5. 加入600 µl Buffer WB2，轻柔震荡使磁珠分散开，颠倒两次后将离心管置于磁力架的磁场中，待磁珠完全聚集后，尽量吸净液体。

6. 重复步骤5一次。

7. 将离心管室温放置3-10 min，或置于37ºC鼓风烘箱5 min，确保残留的乙醇等微量液体完全挥发。

8. 加入50-100 μl Buffer EB，轻柔震荡使磁珠悬于溶液中，室温孵育3-5 min，其间甩动离心管1-2次。将离心管置于磁场中，待磁珠完全聚集后，小心吸取溶液至新离心管中，后续可以置于-20ºC保存。所得溶液即为纯化的RNA/DNA。

注：如需获得更高浓度的样品，可把Buffer EB的体积减小至20 µl，但洗脱下来的RNA/DNA量会相对减少。室温较低时，Buffer EB在37ºC预热片刻对提高得率会有所帮助。此外，洗脱后的溶液再次加回到原磁珠再洗脱一次，可提高得率约10-30%；或者在第一次洗脱后使用新的Buffer EB再洗脱一次，会获得约为第一次洗脱量15-40%的RNA/DNA。

下载产品使用说明书

Q：为什么提取的RNA降解？

A：提取的RNA沉淀没有完全溶解；获取组织后，未立即处理或进行冷冻；细胞可能被胰蛋白酶过度消化；耗材或操作环境中可能含RNase等。

Q：为什么提取RNA时会有DNA污染？

A：用于样品均质化的裂解液过少；样品可能含有有机溶剂（乙醇、DMSO）、强缓冲液或碱性溶液等。

Q：为什么DNA完全或部分降解？

A：获取组织后，未立即处理或进行冷冻；样品提取前储存于-20℃，而不是-80℃等。

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