▍产品信息

动物小RNA提取试剂盒（离心柱式，<200 nt）是一种基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地提取miRNA等小于200个核苷酸（nucleotide, nt）的小RNA（small RNA）的试剂盒。动物组织或细胞中的RNA按照长度可以分为长链RNA（long RNA）和小RNA（small RNA），长链 RNA通常大于200 nt，而小RNA通常小于200 nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、microRNA、siRNA、piRNA、tsRNA、srRNA等。本试剂盒使用安全，通过特殊的柱纯化介质进行小RNA分离纯化，不仅能有效避免传统的Trizol法提取时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂，也能有效避免使用类似于Trizol的裂解液裂解样品、接着使用氯仿分层、后续再进行柱纯化等涉及的有毒有害有机试剂；使用快速、便捷，采用柱纯化，无需繁琐的RNA沉淀步骤，提取操作过程仅20-25 min，相比于传统的Trizol抽提法，能够有效去除大分子RNA，操作流程显著简化，缩短了提取时间，降低了RNA降解的风险；提取获得的小分子量RNA得率高、纯度好，100万培养动物细胞约能抽提得到1-2 µg小RNA，5 mg小鼠肝脏组织约能抽提得到1-1.5 µg小RNA。适用于新鲜或冻存的动物组织或细胞样品小RNA的提取。样品的用量对提取效果影响较大，样品用量过多会导致在第一次过柱时不能最大程度去除200 nt以上的RNA，通常建议培养细胞的用量不超过100万，动物组织的用量不超过5 mg。A260/A280通常为2.0-2.2。

本试剂盒用于提取18-200 nt小RNA，主要包括5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、microRNA (miRNA)，以及short interfering RNA（siRNA）、piRNA、tsRNA等，能够有效去除基因组DNA和200 nt以上的RNA，如28S rRNA、18S rRNA、mRNA等。提取得到的小RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern等常规实验，也可以用于基因芯片分析（microarray）、高通量测序（high throughput sequencing）等对小RNA质量要求较高的情况。

▍产品应用

基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地提取miRNA等小于200个核苷酸（nucleotide, nt）的小RNA（small RNA）。

▍产品保存

室温保存，一年有效。

▍产品组分

▍注意事项

1. 对于富含RNase的样品（如动物组织），建议使用前在Buffer S1中添加二硫苏糖醇（Dithiothreitol, DTT）至终浓度为40 mM（如1 ml Buffer S1中加入20 µl 2M DTT）或β-巯基乙醇至终浓度为1%（如1 ml Buffer S1中加入10 µl β-巯基乙醇），含DTT或β-巯基乙醇的Buffer S1可在室温放置1个月。

2. 本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free，操作时应小心，避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话，以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。

3. 使用冻存的细胞或组织抽提小RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品中的RNA。

4. 本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。

5. 废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。Buffer P1、Buffer P2和Buffer WB中含有乙醇，使用后须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。

6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。