▍产品信息

动物RNA提取试剂盒（离心柱式，>200 nt）是一种基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地提取长度大于200个核苷酸（nucleotide, nt）的RNA的试剂盒。动物组织或细胞中的RNA按照长度可以分为长链RNA（long RNA）和小RNA（small RNA），长链RNA通常大于200 nt，而小RNA通常小于200 nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）和mRNA。本试剂盒使用安全，通过特殊的柱纯化介质进行RNA分离纯化，能有效避免传统的Trizol法提取时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂；使用快速、便捷，采用柱纯化，无需繁琐的RNA沉淀步骤，提取操作过程仅15-20 min。相比于传统的Trizol提取法，操作流程显著简化，缩短了提取时间，降低了RNA被降解的风险；抽提RNA的得率高，提取效果经反复测试，100万个HeLa细胞能提取得到约15-20 µg RNA，20 mg小鼠肝组织能提取得到约25-35 µg RNA，20 mg小鼠脑组织中提取得到约10-20 µg RNA（新鲜样品的得率高于冻存样品）。提取得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2。A260/A230通常为1.9-2.1，纯度高。本产品用于纯化200 nt以上的RNA，对小于200 nt的small RNA即小RNA（如5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、miRNA、piRNA等）被选择性地去除，适用于新鲜或冻存的动物组织或细胞RNA的提取，推荐的细胞用量为50-100万（上限可达1000万），组织用量为15-20 mg（上限可达30 mg）。对于不同的组织或细胞上限会有所差别，例如小鼠肝脏组织的上限可达30 mg，但肌肉组织的上限为20 mg。

提取获得的大于200个核苷酸的RNA可以用于各种常规用途，可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验；也可用于基因表达芯片分析、高通量测序等对RNA质量要求较高的情况。

▍产品应用

基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地提取长度大于200个核苷酸（nucleotide, nt）的RNA。

▍产品保存

室温保存，一年有效。

▍产品组分

▍注意事项

1. 对于富含RNase的样品（如动物组织），建议使用前在Buffer P1中添加二硫苏糖醇（Dithiothreitol, DTT）至终浓度为40 mM（例如1 ml Buffer P1中加入20 µl 2 M DTT）或β-巯基乙醇至终浓度为1%（如1 ml Buffer P1中加入10 µl β-巯基乙醇）。含DTT或β-巯基乙醇的Buffer P1可在室温放置1个月。

2. 通过本试剂盒提取得到的RNA已经去除绝大多数DNA，通常情况无需DNase处理。后续如进行某些对DNA残留较敏感的实验时，可以在使用说明中步骤4离心后，在纯化柱中加入适量DNase I进行消化，具体请参考使用说明。

3. 本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free，操作时应小心，避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话，以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。

4. 使用冻存的细胞或组织提取RNA 的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品中的RNA。

5. 本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。

6. 废液收集管在一次提取中需多次使用，切勿中途丢弃。Buffer P2、Buffer WB1、2中含有乙醇，使用后须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。

7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。