▍产品信息

动物总RNA提取试剂盒（磁珠法）是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，可以从动物组织或培养的动物细胞中安全、便捷、稳定、高效、高质量地抽提总RNA的试剂盒。动物组织或细胞中的RNA按照长度可以分为长链RNA（long RNA）和小RNA（small RNA），长链RNA通常大于200 nt，而小RNA通常小于200 nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、microRNA、siRNA、piRNA、tsRNA、srRNA等。本试剂盒使用安全，通过特殊的磁珠纯化介质进行RNA分离纯化，能有效避免传统的Trizol法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂；使用便捷，采用磁珠纯化，无需繁琐的RNA沉淀步骤，抽提操作过程仅15-20 min。相比于传统的Trizol抽提法，本试剂盒的操作流程显著简化，缩短了抽提时间，降低了RNA被降解的风险；抽提RNA的得率高，抽提效果经反复测试，100万个HeLa细胞能抽提得到约15-20 µg RNA，20 mg小鼠肝组织能抽提得到约25-35 µg RNA，20 mg小鼠脑组织能抽提得到约10-20 µg RNA（新鲜样品的得率高于冻存样品）。本试剂盒适用于新鲜或冻存的动物组织或细胞RNA的抽提，推荐的细胞用量为50-100万（上限可达500万），组织用量为15-20 mg（上限可达30 mg）。不同的组织或细胞用量上限会有所差别，例如小鼠肝脏组织的上限可达30mg，但肌肉组织的上限约为20 mg。抽提获得的RNA包含大分子量RNA和小RNA（<200 nt），也常被称为总RNA（Total RNA），可以用于各种常规分子生物学和生化检测等用途。抽提得到的RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验；也可用于基因表达芯片分析、高通量测序等对RNA质量要求较高的情况。

▍产品应用

从动物组织或培养的动物细胞中安全、便捷、稳定、高效、高质量地抽提总RNA。

▍产品保存

除DNase和Reaction Buffer（10X）以外，室温保存，一年有效。DNase和Reaction Buffer（10X）-20ºC保存，一年有效。其中Buffer Beads长期不使用时，4ºC保存，可以保存更长时间。

▍产品组分

▍注意事项

1. 需自备磁分离装置。

2. 对于富含RNase的样品（如动物组织），建议使用前在Buffer P1中添加二硫苏糖醇（Dithiothreitol, DTT）至终浓度为40 mM（例如1 ml裂解液中加入20 µl 2M DTT）或β-巯基乙醇至终浓度为1%（如1 ml Buffer P1中加入10 µl β-巯基乙醇）。含DTT或β-巯基乙醇的Buffer P1可在室温放置1个月。

3. 如果不使用试剂盒提供的DNase I进行处理，抽提得到的RNA会含有少量的DNA。后续如进行某些对DNA残留较敏感的实验时，需要在使用说明中步骤4后，在磁珠中加入适量DNase I进行消化，具体请参考使用说明。

4. 建议使用推荐的细胞数或组织量用于RNA的抽提，否则可能导致RNA Buffer Beads聚集而使基因组DNA消化不充分。如果基因组DNA消化不充分，可以加大DNase I的用量或延长孵育时间。

5. 本试剂盒提供的所有试剂都是RNase-free，操作时应小心，避免被RNase污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果耗材可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话，以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。

6. 使用冻存的细胞或组织抽提RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织略差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并导致样品中的RNA少量或部分降解。

7. Buffer P2首次使用前要加入无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记（4.8 ml结合液加入1.2 ml，24 ml结合液加入6 ml，100 ml结合液加入24 ml无水乙醇）。

8. 本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。

9. Buffer P2、Buffer WB1、Buffer WB2中含有一定浓度的乙醇，使用后须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。

10. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。